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2023-01-30
細(xì)菌的保存方法（細(xì)菌菌種保存方法）
更新時(shí)間：2022-05-31 19:20:32作者：未知
1、細(xì)菌保存于穿刺培養(yǎng)物中：一般細(xì)菌保存于穿刺培養(yǎng)物可以維持兩年。具體方法如下：用滅菌接種針挑取分散良好的單菌落，針緩慢穿過瓊脂到達(dá)瓶底，連續(xù)幾次，蓋上瓶蓋擰緊，做好標(biāo)記。室溫下存放于暗處。（最好一點(diǎn)可以將瓶蓋放松，在適當(dāng)溫度下培養(yǎng)過夜，再擰緊瓶蓋并加封Parafilm膜，室溫或最好在4度避光保存）。
2、細(xì)菌保存于含有甘油的培養(yǎng)物中：（1）：在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)物：取0.85ml細(xì)菌培養(yǎng)物，加入0.15ml高壓滅菌甘油，振蕩培養(yǎng)物使甘油分布均勻，然后轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的保存管內(nèi)，密封，在乙醇－干冰或液氮中凍結(jié)后再轉(zhuǎn)至－70度長(zhǎng)期保存。在復(fù)蘇時(shí)，用滅菌接種針刮取凍結(jié)的培養(yǎng)物表面，然后立即把黏附于接種針上的細(xì)菌劃于含適當(dāng)抗生素的LB瓊脂平板表面，于37度過夜。
（2）：在瓊脂平板上生長(zhǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)物：從瓊脂平板表面刮下細(xì)菌放入裝有2mlLB的無菌試管內(nèi)，再加入等量的含有30％滅菌甘油的LB培養(yǎng)基，振蕩使甘油完全分布均勻后，分裝于無菌保存管內(nèi)，密封，再按前述方法冰凍保存。這一方法的優(yōu)點(diǎn)在于可用于保存在質(zhì)粒載體上建立的cDNA文庫。