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2022-12-04
培育牛黃形成的條件 培植牛黃和體外培育牛黃
更新時間：2022-06-14 11:30:36作者：佚名
根據(jù)牛黃的成因，可以人為地創(chuàng)造一個有利于牛黃形成的條件：就是埋植異物和注入牛黃菌種來培育出牛黃。然而采用什么樣的異物和選擇什么樣的細菌，這是培育牛黃能否成功以及影響產(chǎn)量與質(zhì)量的關(guān)鍵。
（一）核心的選擇
用圓形、橢圓形中空的聚乙烯塑料網(wǎng)架，外套一層白滌綸布套，根據(jù)牛體大小，膽囊大小，做成大、中、小三號，以能適合膽囊的承受能力。如大小、硬度、彈性適宜，對膽囊會產(chǎn)生良性刺激。核心有妨礙膽囊排空而沉積牛黃的作用，外套滌綸布可使牛黃附著，同時起保護和濾過的作用。如不用滌綸外套，塑料網(wǎng)架上附著極少，只在膽管內(nèi)發(fā)現(xiàn)牛黃沉積。如果塑料核心太小，容易進入膽管，造成膽管阻塞，引起肝臟疾患；如果核心太大、太硬，會刺激膽囊發(fā)生比較嚴(yán)重的炎癥，組織產(chǎn)生排異反應(yīng)，網(wǎng)架核心上沉積一些硬塊，或沉積太少。硬塊牛黃的質(zhì)量差，膠質(zhì)較多，藥廠不愿收購。
大型：長6厘米，寬4.5厘米，厚0.3厘米，長橢圓形、中空、上部開口2厘米，外套多皺折的白滌綸布套，內(nèi)又放入一個多皺折的小布套。
中型：長55厘米、寬4厘米、厚0.15厘米，中空，上緣開口2厘米，外套白滌綸布。
小型：長5厘米，寬4厘米，橢圓形，后部不封口，從前端到后端有三條縱溝，這樣彈性較大，不致壓扁，能恢復(fù)原狀。
以上三種型號，要根據(jù)膽囊的大小而選擇使用。
（二）牛黃菌種的選擇
菌種是成黃的關(guān)鍵，不是任何細菌都能形成牛黃的。在無菌原則下，從天然牛黃中和膽汁中取樣分離培養(yǎng)。在37℃恒溫培養(yǎng)24小時后，從瓊脂平皿上挑起單個菌落作純培養(yǎng)，最后作生化反應(yīng)，并進行比較、篩選、保留了一部分菌種。在保留菌種中的一部分又進行馴化培養(yǎng)，即用遞增濃度的瓊脂膽汁培養(yǎng)基進行馴化；另一些（某幾種）接種于牛的膽囊，繼代培養(yǎng)，已培養(yǎng)至2-3代。已分離到的菌種有普通大腸桿菌、奇異變形桿菌、枸櫞酸大腸桿菌。這些菌種又在取黃時加以比較，隨后保存高產(chǎn)的，淘汰低產(chǎn)的。如果將從其他地方分離出來的大腸桿菌例如豬等動物糞便中的大腸桿菌，用作牛黃菌種，不但毒力難于控制，而且牛黃的產(chǎn)量與質(zhì)量均不理想，副作用大。
培養(yǎng)基的種類
1．普通肉湯培養(yǎng)。基牛肉膏0.3克、蛋白胨1克、氯化鈉0.5克、水100毫升。pH測定為6.8-7.2，高壓蒸氣滅菌，備用。
2．普通瓊脂培養(yǎng)基。普通肉湯培養(yǎng)基100毫升，瓊脂20克，pH測定為6.8-7.2，高壓蒸氣滅菌備用。
3．馴化培養(yǎng)基（遞增濃度的膽汁培養(yǎng)基）。
①普通瓊脂培養(yǎng)基90毫升、膽汁10毫升。②普通瓊脂培養(yǎng)基80毫升、膽汁20毫升。③普通瓊脂培養(yǎng)基70毫升、膽汁30毫升。④普通瓊脂培養(yǎng)基60毫升、膽汁40毫升。⑤普通瓊脂培養(yǎng)基50毫升、膽汁50毫升。⑥普通瓊脂培養(yǎng)基40毫升、膽汁60毫升。
馴化方法：將菌種先接于含膽汁濃度最低的培養(yǎng)基中，在37℃培養(yǎng)24小時，將獲得的菌落，按濃度逐級遞增馴化培養(yǎng)。
擴大培養(yǎng)：將馴化的菌種，選擇生長良好的菌落，接種于肉湯培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)24小時，肉湯均勻混濁即可供用。
牛黃菌液的保存，應(yīng)保存在普通冰箱1-4℃，可保存3個月，不能放入冷凍室。異物核心和牛黃菌種，對于形成牛黃是必不可少的。作育黃手術(shù)時，只放了核心，不注射牛黃菌種，不會形成牛黃。只注射菌種，而不埋置核心，同樣不會形成牛黃。
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